Dėkojame, kad apsilankėte Nature.com.Naudojama naršyklės versija turi ribotą CSS palaikymą.Norėdami gauti geriausią patirtį, rekomenduojame naudoti atnaujintą naršyklę (arba išjungti suderinamumo režimą „Internet Explorer“).Tuo tarpu norėdami užtikrinti nuolatinį palaikymą, svetainę pateiksime be stilių ir „JavaScript“.
Potrauminio streso sutrikimas (PTSD) pasižymi gebėjimu neutralizuoti baimės reakcijas į signalus, susijusius su trauma.Žmonių ir gyvūnų tyrimai rodo, kad tam tikrų priekinės žievės sričių, kaip pagrindinių tarpininkų, lemiančių baimės slopinimo sėkmę, įsitraukimo skirtumai, tačiau nervinių grandinių, lemiančių skirtingą šių sričių įsitraukimą, sąveika nėra aiški.Norėdami geriau suprasti, kaip individualūs išnykimo prisiminimo skirtumai atsispindi neuronų grandinės aktyvumo skirtumai, žiurkės sublimbinės žievės (IL) projekcijas pažymėjome retrogradiniais žymekliais ir palyginome neuronų projekcijas IL projekcijos neuronų viduje ir išorėje.Mes išanalizavome šiuos duomenis, sugrupuodami juos pagal žiurkių blukimo atminties išsaugojimo laipsnį.Mes nustatėme, kad IL projekcinėse ląstelėse užpakalinio paratalamo neuronai padidino žiurkių aktyvumą, o tai parodė gerą išnykimo prisiminimą.Be IL projektuojančių ląstelių, padidėjęs Fos aktyvumas buvo pastebėtas pasirinktose žiurkės klausos ir ventralinio hipokampo srityse, turinčiose gerą skiriamąją gebą.Mūsų rezultatai rodo, kad išnykimo prisiminimo skirtumai yra susiję su specifiniais nervų veiklos modeliais IL projekcijose ir už jų ribų.
Baimės sąlygojimas atsiranda, kai neutralus dirgiklis yra susietas su aversyviu besąlyginiu dirgikliu (UCS), todėl iš pradžių neutralus dirgiklis, dabar sąlyginis dirgiklis (CS), sukelia sąlyginę baimės reakciją (CR), jei UCS nėra.Sąlyginės baimės panaikinimą lėmė CR sumažėjimas iki CS dėl pakartotinio CS pateikimo nesant UCS1.Ankstesni tyrimai parodė, kad potrauminio streso sutrikimas (PTSD) yra susijęs su nesugebėjimu prisiminti sąlyginės baimės reakcijų išnykimo2.Kognityvinės elgesio terapijos kertinis akmuo potrauminio streso sutrikimo gydymui yra ekspozicijos terapija, pagrįsta išmoktų baimės reakcijų išnykimu3,4.Todėl individualių graužikų išnykimo baimės ir pagrindinių nervinių mechanizmų skirtumų tyrimai gali padėti išsiaiškinti žmonių reakcijų į traumą ir potrauminio streso sutrikimo gydymo skirtumus.Nepaisant pažangos nustatant neuroninius mechanizmus, kurie skiria sėkmingus ir nesėkmingus išnykimo prisiminimus, dar daug ką reikia atrasti.
Graužikų modeliai yra naudingi šiame darbe, nes yra reikšmingi individualūs graužikų išnykimo prisiminimo skirtumai7,8,9,10.Ankstesnis darbas, tiriantis neuroninius baimės išnykimo mechanizmus populiacijos lygmeniu, parodė, kad norint atminti išnykimą, reikia aktyvuoti infralibinę žievę (IL) (11, 12, 13 nuorodos, bet žr. 14), o kai kuriuose tyrimuose nustatyta, kad graužikų aktyvumas IL rodo blogą atmintį apie išnykimą, palyginti su graužikais, kurių labai bijoma.Tačiau mechanizmai, kuriais IL skirtingai dalyvauja palengvinant graužikų baimės pašalinimą, palyginti su tais, kurių išnykimas yra silpnesnis, yra neaiškūs.
Viena iš galimybių yra ta, kad baimės išnykimo atminties skirtumai tarp individų yra skirtingo specifinių aferentinių IL aktyvavimo rezultatas.Anatominiai tyrimai18 parodė, kad įvairios smegenų žievės ir subkortikinės sritys siunčia tankias projekcijas į IL, o tai savo ruožtu siunčia eferentines projekcijas į daugelį smegenų sričių.Gyventojų lygmens tyrimai parodė, kad IL projekcijos į migdolą yra svarbios norint įgyti baimės išnykimą20, 21, 22, o IL įvestis iš bazolaterinės migdolinės dalies (BLA) taip pat yra susijusi su išnykimo mokymusi.Yra mažiau tyrimų apie IL-centruotų grandinių įtraukimą į išnykimo prisiminimą, nors naujausi darbai rodo, kad tiek ventralinis, tiek nugarinis hipokampas yra susijęs su IL prognozavimu.Eferentinės IL projekcijos į rekombinuojantį talamo branduolį, matyt, taip pat dalyvauja baimės išnykimo atmintyje.
Šie ankstesni tyrimai pradeda piešti neuroninių grandinių, susijusių su išnykimo prisiminimu, sąveiką, tačiau yra labai mažai duomenų apie tai, ar aktyvumas IL centre esančiose neuroninėse grandinėse turi įtakos individualiems išnykimo prisiminimo skirtumams.Čia mes siekėme nustatyti, ar baimės išnykimo atminties skirtumai tarp asmenų yra susiję su IL įvesties aktyvacijos pokyčiais tam tikruose smegenų regionuose.Visų pirma, mes įvertinome IL aferentinių ląstelių aktyvaciją talamo (PVT), raktikaulio (CLA), BLA ir ventralinio hipokampo (vHPC) paraventrikuliniame branduolyje.Šie smegenų regionai buvo pasirinkti dėl to, kad jie siunčia tankias projekcijas į IL, ir todėl, kad yra pagrindo įtarti, kad jie gali būti susiję su baimės išnykimu18.Pavyzdžiui, neseniai atliktas tyrimas parodė, kad PVT, regionas, susijęs su baimės įgijimu ir dauginimu, reikalingas išnykimo reprodukcijai.Be to, ankstesni tyrimai parodė padidėjusį bazinio migdolinio kūno ir vHPC aktyvumą žiurkėms, išreiškiančioms išnykimo atmintį.Galiausiai, klaustuko analizė yra labiau tiriamoji, nes nė viename ankstesniame darbe nebuvo įvertintas jo vaidmuo išnykstant.Tačiau naujausi darbai rodo, kad tai vaidina svarbų vaidmenį nustatant baimės kontekstą29.
Virusiniai GFP konjuguoti retrogradiniai žymekliai buvo švirkščiami į žiurkių IL prieš elgsenos tyrimą, o Fos aktyvumas IL aferentuose buvo matuojamas išnykimo kartojimo, baimės prisiminimo metu ir žiurkėms, kurioms nebuvo atlikti elgesio tyrimai.Mūsų rezultatai rodo, kad projekcijos nuo užpakalinio paraventrikulinio talamo iki IL rodo padidėjusį aktyvumą žiurkėms, kurios sėkmingai prisimena išnykimą.Be IL prognozių, žiurkėms, kurios gerai regresavo, buvo padidėjęs nervų aktyvumas tam tikrose raktikaulio ir ventralinio hipokampo srityse.Mūsų rezultatai rodo, kad vidinės ir išorinės nervinės veiklos modeliai, projektuojami į IL, yra susiję su individualiais baimės išnykimo atminties skirtumais.
Kaip tiriamieji buvo naudojami penkiasdešimt keturi suaugę Sprague-Dawley žiurkių patinai (300–325 g atvykus), gauti iš Charles River Laboratories (Raleigh, NC).Žiurkės buvo laikomos poromis su laisva prieiga prie maisto ir vandens pagal 12 valandų šviesos / tamsos ciklą (šviesa įjungiama 7 val. ryto).Šiems eksperimentams buvo naudojamos dvi žiurkių grupės (n = 28 ir n = 26).Išskyrus mirtį, chirurginę klaidą, GFP ekspresijos trūkumą tikslinėje vietoje, prastą audinių kokybę ir elgesio problemas (paaiškinta Metoduose), išnykimo atšaukimo grupėje buvo 21 žiurkė, o baimės prisiminimo grupė – 7 žiurkės, namų narvai.grupę sudarė 7 žiurkės (35 žiurkės buvo įtrauktos į galutinę analizę).Visas procedūras patvirtino Stony Brook universiteto institucinis gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas ir jos atitiko ARRIVE gaires (https://arriveguidelines.org) ir NIH laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo gaires.
Žiurkės buvo gydomos dvi dienas prieš operaciją.Žiurkės buvo anestezuotos ketaminu (87 mg / kg) ir ksilazinu (10 mg / kg), patalpintos į stereotaksinį aparatą (Stoelting, Woodale, IL) ir gautos vienpusės AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) injekcijos į IL.(subalansuokite kairę ir dešinę injekcijas).Injekcijai į vietą buvo nuleista 22 dydžių kaniulė (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Į kreipiamąją kaniulę įkiškite 28G vidinę kaniulę (prijungtą prie infuzijos pompos per PE 20 vamzdelį), kad būtų tiekiama 0,6 µl viruso 0,15 µl per minutę greičiu ir palikite 5 minutes, kai infuzija bus nepažeista..Po susiuvimo žiurkėms buvo suleista meloksikamo (1 mg/kg), o kai tik jos galėjo judėti, jos buvo grąžintos į narvus.Žiurkės narvuose buvo laikomos maždaug 7 savaites, kad virusas galėtų atsigauti ir judėti atgal.Trys žiurkės mirė anestezijos metu, todėl 51 žiurkė (94%) sėkmingai pasveiko po operacijos.
Visos procedūros buvo atliktos 32 cm × 25 cm × 21 cm kondicionavimo kamerose (Clever Systems Inc., Reston, VA), esančiose 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm garsą sugeriančiose izoliacinėse dėžėse (Clever Sys. . Inc.).).Per išnykimo mokymosi ir išnykimo prisiminimo sesijas kontekstas buvo pakeistas, kad skirtųsi nuo pradinio sąlyginio konteksto.Į sąlygą A (baimės generavimas) buvo įtrauktos 28 voltų kaitrinės buitinės lemputės (Chicago Micro Lighting, JK), o B sąlyga (gesimo mokymas, išnykimo prisiminimo testas ir baimės prisiminimo testas) apima infraraudonųjų spindulių LED lempas (Univivi IR Illuminator, Shenzhen). ., Kinija;U48R).Be to, kontekste A yra antivibracinės grotelinės grindys su nerūdijančio plieno ir organinio stiklo sienomis, o kontekste B ant grindų ir sienų yra dažytų metalinių intarpų.Konteksto B forma taip pat buvo pakeista į standartinę kondicionavimo kamerą įdedant 33,5 cm x 21,3 cm išlenktą metalinį įdėklą.Be to, A kontekste kameros buvo nuvalytos 5% acto rūgštimi, o kontekste B kameros buvo nuvalytos 5% amonio hidroksidu.Galiausiai, atsižvelgiant į B kontekstą, žiurkės buvo įnešamos į bandymų kambarį kibirais, o ne voliojamos narvuose ant vežimėlių.Elgesio seansai buvo įrašyti viršutine kamera, o vaizdo signalas iš kiekvienos kameros buvo įvestas į programinę įrangą (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA), kuri įvertino blukimo elgesį pagal pikselių pokyčius.Parametrai buvo parinkti taip, kad kompiuterio įvertintas blukimo elgesys labai atitiktų apmokytų stebėtojų elgesį, įvertintą rankiniu būdu.Vertė, rodanti užšalimo laiko procentą, susuktą per 30 sekundžių intervalą.
Visos elgsenos programos vykdomos šviesiosios šviesos/tamsos ciklo metu.Žiurkės buvo gydomos likus 5 dienoms iki elgesio procedūrų pradžios ir per paskutines tris gydymo dienas vežamos į elgesio kambarį.Pirmąją elgsenos testo dieną žiurkių grupė išnykimo atkūrimo žiurkių buvo patalpinta į baimės sąlygotą refleksą, tada įtraukta į kontekstą A, suteikiamas 6 min nestimuliuojamas aklimatizacijos laikotarpis, o po to abi kombinacijos – 4 kHz, 76 dB, 30 s. .tonas ir bendras nutraukimas, 1,0 mA, smūgis 1 s (2 min. ITI).Visiems elgesio mokymams žiurkės buvo grąžintos į narvus praėjus 2 minutėms po paskutinio stimulo pateikimo.Kitą dieną žiurkės iš išnykimo-atsišaukimo grupės buvo patalpintos į kontekstinę patalpą B ir atliko 20 garso pristatymų (2 min. ITI) kaip išnykimo treniruotę po 6 minučių pripratimo.Kitą dieną išnykimo reprodukcijos grupės žiurkės buvo veikiamos 4 tonais B kontekste po 6 minučių aklimatizacijos laikotarpio kaip išnykimo testas.Išnykimo atminties grupės žiurkės buvo perfuzuotos praėjus 60 minučių po elgesio seanso.Grupei kontrolinių žiurkių, sukeliančių baimės prisiminimus, ta pati procedūra buvo atlikta pirmąją baimės sąlygoto atsako dieną kontekste A. Po keturiasdešimt aštuonių valandų žiurkės buvo patalpintos į kontekstinę patalpą B ir jai buvo atlikti 4 garso pristatymai (2- minutės ITI) kaip prisiminimo testą.baimė po 6 minučių aklimatizacijos laikotarpio.Žiurkės buvo perfuzuotos praėjus 60 minučių po elgesio sesijos.Grupė naminių kontrolinių žiurkių liko savo namų narvuose viso eksperimento metu ir buvo perfuzuojama tą pačią dieną kaip ir eksperimentinės žiurkės.Kiekviena iš dviejų žiurkių grupių buvo suskirstyta į dvi serijas, o gyvūnų skaičius kiekvienoje grupėje buvo subalansuotas tarp serijų.Viena žiurkė baimės prisiminimų grupėje buvo pašalinta iš analizės, nes ji neparodė baimės sąlygojimo požymių (baimės prisiminimų testo metu sustingo mažiau nei 15 proc. laiko).Žr. 2A pav. elgsenos laiko juostos diagramą.
Žiurkės buvo perdozuotos Fatal Plus tirpalo (100 mg/kg), po to perfuzuojamos lediniu 10 % PBS, po to 10 % buferiniu formalinu.Smegenys buvo pašalintos ir maždaug 1 savaitę laikomos 30% sacharozės tirpale formaline 4 °C temperatūroje.Tada smegenys buvo užšaldytos ir supjaustytos į 40 µm storio kriostatą.Sekcijos buvo laikomos nuosekliai 10% PBS 4 ° C temperatūroje.Tada imunofluorescencija buvo atlikta laisvai plūduriuojančiose sekcijose, kuriose buvo dominanti smegenų sritis.Pjūviai buvo plaunami 3 kartus 10% PBS po 5 minutes.Tada sekcijos buvo inkubuojamos 5% blokuojančiame normalaus ožkos serumo tirpale 2 valandas kambario temperatūroje, o po to dar tris kartus plaunamos po 5 minutes 10% PBS.Tada sekcijos buvo inkubuojamos per naktį 4 °C temperatūroje pirminiuose antikūnuose (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA), praskiestuose 1% BSA 10% PBS.Kitą dieną sekcijos buvo plaunamos 10% PBS 30 minučių 4 °C temperatūroje, po to 3 kartus 5 minutes 10% PBS ir inkubuojamos su antriniu antikūnu (Alexa Fluor 594 ožkos anti-triušis, raudonas konjugatas, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) kambario temperatūroje 2 valandas.Po 3 papildomų plovimų 10% PBS 5 minutes, sekcijos buvo dedamos ant stiklinių stiklelių ir užsandarintos Fluoromount-G (Invitrogen).Žr. reprezentatyvius imuninio dažymo vaizdus 3G paveiksle.
Fluorescencinis mikroskopas, naudojant skaitmeninę kamerą Infinity3 (Lumenera, Otava, Ontarijas, Kanada) ir šviesos variklį (Lumencor, Beaverton, OR), prijungtą prie Zeiss mikroskopo, buvo naudojamas vaizdams iš kiekvieno dominančio smegenų regiono gauti, įskaitant skyrius, kuriuose yra IL be imunofluorescencijos.atliekama siekiant patvirtinti teisingą injekcijos vietą.Ląstelių skaičiavimui naudojami vaizdai buvo gauti 20 kartų padidinus.Kiekvienai audinio pjūviui padarykite vieną vaizdą su filtru, leidžiančiu vizualizuoti GFP, ir vieną vaizdą su filtru, leidžiančiu vizualizuoti Alexa Fluor raudoną konjugatą antriniame antikūne, o vaizdui buvo naudojama vaizdo gavimo programinė įranga (Infinity Analyze, 3 versija). perdanga.Gaukite visus visų smegenų sričių vaizdus naudodami tą patį ekspozicijos laiką ir padidinkite nustatymus.Šešios žiurkės buvo pašalintos iš analizės, nes pagrindinis viruso perdavimas įvyko už IL (88% pataikymo rodiklis).Dar aštuonios žiurkės buvo neįtrauktos, nes, nepaisant viruso, užpuolusio IL, jos neparodė pakankamos GFP ekspresijos visuose tiksliniuose smegenų regionuose.Be to, viena žiurkė buvo pašalinta dėl prastos audinių kokybės.
Sureguliuokite ryškumą ir kontrastą, kad sumažintumėte foninį triukšmą vaizde J (NIH), naudodami tą pačią procedūrą kiekvienam vaizdui.Eksperimento vykdytojas rankiniu būdu nustatė visų retrogradiškai pažymėtų ląstelių, Fos pažymėtų ląstelių ir visų dvigubai pažymėtų ląstelių skaičių, naudodamas „Image J“ citometro papildinį.Ląstelių skaičius buvo normalizuotas iki ląstelių/mm2.Norint analizuoti Fos ekspresiją IL projektuojančiose ląstelėse, dvigubai pažymėtų ląstelių skaičius buvo normalizuotas iki bendro retrogradiškai pažymėtų ląstelių skaičiaus.Atliekant mBLA, mvHPC ir pvHPC analizę, ląstelių skaičius iš kelių 20x vaizdų buvo sumuojamas ir normalizuotas iki ląstelių/mm2.Likusių smegenų sričių analizei buvo išanalizuotas 20x vaizdas arba 20x vaizdo dalis ir normalizuota iki ląstelių/mm2.vHPC analizė apėmė CA1, CA2 ir subdominuojančius vHPC regionus.1 paveiksle pavaizduoti smegenų sritys, analizuojamos naudojant vaizdus, ​​brėžiančius priekinę ir užpakalinę plokštumos sieną.
Dominančių smegenų sričių santrumpos ir vieta.Rankraštyje pateiktų smegenų sričių santrumpų ir vietų paaiškinimas.Viešojo domeno smegenų žemėlapis, paimtas iš Swanson (2004 m.) Smegenų žemėlapis: Žiurkės smegenų struktūra, 3-asis leidimas, licencijuotas pagal Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 tarptautinę licenciją (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), galima atsisiųsti adresu https://larrywswanson.com.
Užšaldymo laiko procentas yra apskaičiuojamas per 30 sekundžių tono atkūrimo laikotarpį, neįskaitant tarpinių intervalų.Išnykimo atšaukimo dažnis buvo apskaičiuotas išreiškiant išnykimo laiko procentą išnykimo atšaukimo metu kaip išnykimo procentą per pirmuosius 4 išnykimo mokymo bandymus (išnykimas per keturis išnykimo atšaukimo tonus / išnykimas per pirmuosius keturis išnykimo mokymo tonus * 100).Žemi balai rodo gerą išblukimo atmintį, o aukšti – prastą išblukimo atmintį.Žiurkės buvo surūšiuotos pagal išnykimo prisiminimo balą, o žiurkės, esančios viršutiniame išnykimo atminimo balo trečdalyje, buvo klasifikuojamos kaip „blogos išnykimo žiurkės“, o žiurkės, kurių išnykimo prisiminimo balas buvo paskutiniai du trečdaliai, buvo klasifikuojamos kaip „geros“.Blėsta atmintis žiurkės.
Neparametriniai testai naudojami, nes duomenys dažnai pažeidžia prielaidas apie normalųjį pasiskirstymą ir (arba) dispersijų homogeniškumą.Spearmano rango koreliacija buvo naudojama siekiant nustatyti, ar yra reikšmingas ryšys tarp išnykimo prisiminimo balų ir Fos žymenų bei dviejų žymenų dominančiose smegenų srityse visoms žiurkėms, kurioms buvo atliktas išnykimo prisiminimo testas.Mann-Whitney U testas buvo naudojamas siekiant nustatyti, ar yra skirtumas tarp dviejų nepriklausomų grupių.Kruskal-Wallis testas naudojamas nustatyti, ar 2 ar daugiau grupių skiriasi viena nuo kitos, o Dunn daugkartinio palyginimo testas naudojamas, kai Kruskal-Wallis statistika yra reikšminga.Išblukimas mokymosi išnykimo metu buvo įvertintas naudojant kartotinių matų dispersijos analizę, kai grupė yra tarpsubjektinis veiksnys ir testas kaip vidinis veiksnys. Rezultatai buvo laikomi reikšmingais, kai visų statistinių testų p < 0,05. Rezultatai buvo laikomi reikšmingais, kai visų statistinių testų p < 0,05. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Visų statistinių testų rezultatai buvo laikomi reikšmingais, kai p < 0,05.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Visų statistinių testų rezultatai buvo laikomi reikšmingais, kai p < 0,05.
2 paveiksle parodyta eksperimentinė laiko juosta (2A pav.) ir visų išnykusių žiurkių dažnių pasiskirstymas (2B pav.). Gero ir prasto išnykimo grupių žiurkės reikšmingai skyrėsi pagal šiuos apskaičiuotus išnykimo prisiminimo balus (U = 0, p < 0,001) (2C pav.). Gero ir prasto išnykimo grupių žiurkės reikšmingai skyrėsi pagal šiuos apskaičiuotus išnykimo prisiminimo balus (U = 0, p < 0,001) (2C pav.). Крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим по этим рассчитанным рассчитанным рассчитанным рассчитанным рассчитанным по этим рассчитанным рассчитанным. Geros ir prastos išnykimo grupėse esantys žiurkės reikšmingai skyrėsi šiais apskaičiuotais išnykimo atšaukimo rodikliais (U=0, p<0,001) (2C pav.).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存傛. U = 0, p < 0,001 (图2C， (В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы вигруппах с хорочим и плохим угах.0.0.0 Pagal šiuos apskaičiuotus išnykimo atšaukimo dažnius žiurkės geros ir prastos išnykimo grupėse labai skyrėsi (U = 0, p < 0,001) (2C pav.).Baziniu baimės sąlygoto reflekso seanso laikotarpiu nebuvo reikšmingo užšalimo laiko skirtumo tarp grupių, kurių išnykimas, silpnas išnykimas ir baimės prisiminimas (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (2D pav.).Be to, pateikiant pirmąjį baimės sąlygoto reflekso toną, nebuvo reikšmingo sustingimo laiko skirtumo tarp grupių, kurių išnykimas, blogas išnykimas ir baimės prisiminimas (X2(2) = 1,107, p = 0,575), nes taip pat baimės metu per antruosius tonus.Kondicionavimo seanso metu buvo reikšmingas užšalimo laiko skirtumas tarp grupių, kurių išnykimas buvo geras, išnykimas prastai ir baimės prisiminimas (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (2D pav.).Taip pat nebuvo reikšmingo išblukimo laiko skirtumo tarp gero ir prasto išnykimo grupių pradinio išnykimo mokymo laikotarpiu (U = 45,00, p = 0,799) (2D pav.). Be to, buvo reikšmingas pagrindinis bandomojo bloko poveikis (5 tonai bloke) laikui, praleistam sušalus ekstinkcijos mokymo sesijos metu (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), o tai rodo, kad įvyko išnykimo mokymasis (2D pav. ). Be to, buvo reikšmingas pagrindinis bandomojo bloko poveikis (5 tonai bloke) laikui, praleistam sušalus ekstinkcijos mokymo sesijos metu (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), o tai rodo, kad įvyko išnykimo mokymasis (2D pav. ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис. 2D). Tada buvo reikšmingas pagrindinis bandomojo bloko poveikis (5 tonai bloke) laikui, per kurį sustingsta per ekstinkcijos mokymą (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), o tai rodo, kad vyksta išnykimo mokymasis (1 pav. . 2D). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 （（f （2,884，54,80） = 8,331 ， p <0,001） ， 表明 发生 了 学习 学习 （（图 2d））））））））） （（（图 2d）））） ， 学习 了 学习 （（图 2d）））） .接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 （（f （2,884，54,80） = 8,331 ， p <0,001） ， 表明 发生 了 学习 学习 （（图 2d））））））））） （（（图 2d）））） ， 学习 了 学习 （（图 2d）））） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис . 2D). Tada, mokantis apie išnykimą, bandomieji blokai (5 tonai bloke) turėjo reikšmingą pagrindinį poveikį išnykimo laikui (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), o tai rodo, kad vyksta išnykimo mokymasis (.2D pav.). .Tačiau išnykimo grupė (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) neturėjo reikšmingos įtakos išnykimo laikui per visą išnykimo mokymo laikotarpį ir nebuvo jokios sąveikos tarp bandomojo bloko ir išnykimo grupės (F(4) , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (2D pav.). Bandymo sesijos metu buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo ir baimės prisiminimo grupių laiko, praleisto sušalant pradiniu laikotarpiu (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), todėl baimės prisiminimo grupė reikšmingai sustingo. daugiau nei geros išnykimo grupės (vidutinis rango skirtumas = 10,57, p = 0,017), bet ne prastos išnykimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = - 3,714, p > 0,999) (2D pav.). Bandymo sesijos metu buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo ir baimės prisiminimo grupių laiko, praleisto sušalant pradiniu laikotarpiu (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), todėl baimės prisiminimo grupė reikšmingai sustingo. daugiau nei geros išnykimo grupės (vidutinis rango skirtumas = 10,57, p = 0,017), bet ne prastos išnykimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = - 3,714, p > 0,999) (2D pav.).Testavimo sesijos metu buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo ir baimės prisiminimo grupių laiko, praleisto sušalant pradiniu laikotarpiu (X2(2) = 8,569, p = 0,014), todėl baimės prisiminimo grupė sustingo. gerokai .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). didesnis nei gero išnykimo grupėje (vidutinis rangų skirtumas = 10,57, p = 0,017), bet ne blogo išnykimo grupėje (vidutinis rango skirtumas = -3,714, p > 0,999) (2D pav.).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间方面存在显着差异（X2 (2) = 8.569，p = 0.014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,2＀D＀在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差 = 10,57, p = 0,017 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа, =. Bandymo laikotarpiu buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo grupės, blogo išnykimo grupės ir baimės prisiminimo grupės pagal užšalimo laiką pradiniame lygyje (X2(2) = 8,569, p = 0,014), todėl baimės prisiminimas grupė užšąla žymiai dažniau nei grupė, kurios išnykimas buvo geras (vidutinis rangų skirtumas = 10,57, p = 0,017), bet ne grupė su blogu išnykimu (vidutinis rangų skirtumas = -3,714, p > 0,999) (2D pav.).Geros išnykimo grupės, blogos išnykimo grupės ir baimės prisiminimo grupės taip pat turėjo reikšmingai skirtingą išnykimo laiką bandomosios sesijos tono pateikimo metu (X2(2) = 14,93, p = 0,001), todėl gero išnykimo grupė turėjo žymiai mažiau laikas.užšalimo laiko nei silpno išnykimo grupėje (vidutinis rangų skirtumas = 9,286, p = 0,044) ir baimės atminties grupėje (vidutinis rangų skirtumas = 13,86, p = 0,001) (2D pav.).
Individualūs išnykimo prisiminimo skirtumai.(A) Chirurginių ir elgesio procedūrų metmenys.(B) Dažnio pasiskirstymas, rodantis individualius nykstančios atminties balų skirtumus.(C) Įrodymai, kad grupės, sukurtos remiantis apskaičiuotais išnykimo prisiminimo balais, yra du skirtingi fenotipai.(D) Vidutinė procentinė dalis laiko, kai žiurkės užšąla dėl blogo išnykimo, gero išnykimo ir baimės prisiminimo 30 sekundžių sąlyginio baimės reflekso seanso ląstelėse, 20, 30 s tonais, išnykimo mokymosi sesijos metu subyrėjo į 5 blokus (4 tonai) .kiekvienas) ir keturiais tonais prisiminimų apie išblukimą ir prisiminimų apie baimę seansuose.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Į IL buvo sušvirkštas retrogradinis indikatorius (3A pav.) ir nustatytas GFP+ ląstelių skaičius išilgai dominančios srities priekinės-užpakalinės ašies (3B-F pav.).Buvo reikšmingas skirtumas tarp GFP+ ląstelių skaičiaus tarp priekinės, vidurinės ir užpakalinės PVT (X2(2) = 8,200, p = 0,017), todėl mPVT parodė žymiai daugiau GFP+ ląstelių nei aPVT (vidutinis rangas) Diff.= 18,37, p = 0,035) ir pPVT (vidutinis rango skirtumas = 17,71, p = 0,045) (3C pav.).Nors keli gyvūnai pCLA neaptiko jokių GFP+ ląstelių ir todėl negalėjo nustatyti aktyvumo šiame regione, reikšmingo skirtumo tarp priekinės, vidurinės ir užpakalinės CLA nebuvo (X2(2) = 5,596, p = 0,061).GFP+ ląstelių skaičius (3D pav.).Tada, kadangi kai kurios GFP+ ląstelės buvo aptiktos aBLA arba avHPC keliose žiurkėse, buvo analizuojama tik šių sričių vidurys ir galas.Vidurinė ir užpakalinė BLA (U=393, p=0,009) reikšmingai skyrėsi GFP+ ląstelių skaičiumi, todėl pBLA rodė daugiau IL projekcijų nei mBLA (3E pav.).Panašiai buvo reikšmingas skirtumas tarp vidutinių ir užpakalinių vHPC, todėl pvHPC rodė daugiau IL projekcijų nei mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (3F pav.).3G paveikslas yra pavyzdinis vaizdas, kuriame rodomos Fos, aavRG-GFP ir dvigubai pažymėtos ląstelės.
Įvertinkite IL aferentus visame dominančiame smegenų regione.(A) Scheminis aavRG-CAG-GFP pasiskirstymas visoje žiurkės IL.(B) Reprezentatyvūs retrogradinių žymenų vaizdai skirtingose ​​​​anteroposteriorinėse dominančio smegenų srities vietose.Kiekybinis retrogradinio žymėjimo išilgai anteroposteriorinės ašies (C) paraventrikulinio talamo, (D) raktikaulio, (E) bazolaterinio tonzilių ir (F) ventralinio hipokampo.(G) Reprezentatyvūs vaizdai, rodantys retrogradinį aavRG ženklinimą, Fos ženklinimą ir dvigubą aavRG bei Fos ženklinimą aPVT.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Mastelio juosta 100 µm.Viešojo domeno smegenų žemėlapis A skydelyje yra atkurtas iš Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, licencijuotas pagal Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 tarptautinę licenciją (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) galima atsisiųsti iš https://larrywswanson.com.
Visų žiurkių pasaulinis ir IL projekcijai būdingas Fos aktyvumas buvo analizuojamas aPVT, mPVT ir pPVT.Nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijos aPVT (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (4A pav.), taip pat nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos. aPVT tarp ekspresijos ir ekstinkcijos prisiminimo (rs = 0,092, p = 0,691) (4B pav.) arba tarp Fos ekspresijos aPVT IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo (rs = 0,143, p = 0,537) (4D pav.).Tačiau aPVT IL aferentuose Fos ekspresija reikšmingai skyrėsi tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių (X2(3) = 15,05, p = 0,002), todėl baimės prisiminimo grupė parodė gana gerą išnykimą.regresijos (vidutinis rangų skirtumas = 11,54, p = 0,003), prastos regresijos (vidutinis rangų skirtumas = 10,57, p = 0,034) ir namų ląstelės (vidutinis rangų skirtumas = 12,79, p = 0,005) grupės (4C pav.).Be to, nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijai mPVT (X2 (3) = 2,272, p = 0,518) (4E pav.) ir Fos ekspresijai mPVT..Reikšminga koreliacija su išnykimo prisiminimu (rs = 0,168 p = 0,468) (4F pav.).Nors buvo reikšmingas skirtumas tarp gerų, blogų, baimės prisiminimų ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijoje IL aferentinėse mPVT ląstelėse (X2 (3) = 9, 252, p = 0, 026), post hoc palyginimas neatskleidė nė vieno ar dviejų.Reikšmingi skirtumai tarp grupių (4G pav.).Be to, nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentinėse mPVT ląstelėse ir išnykimo atkūrimo (rs = 0,174, p = 0,450) (4H pav.). Be to, buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), todėl gero išnykimo grupė (vidutinis reitingas) Skirtumas = 14,96, p = 0,010), bet ne prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 12,86, p = 0,113) arba baimės prisiminimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas = 2,571, p > 0,999), rodė daugiau Fos išraiškos nei namų narvo grupė (4I pav.). Be to, buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), todėl gero išnykimo grupė (vidutinis reitingas) Skirtumas = 14,96, p = 0,010), bet ne prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 12,86, p = 0,113) arba baimės prisiminimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas = 2,571, p > 0,999), rodė daugiau Fos išraiškos nei namų narvo grupė (4I pav.). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Be to, buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijoje pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), todėl gero išnykimo grupė (vidutinis rango skirtumas). = 14,96, p = 0,010), bet ne prasto išnykimo grupėje (vidutinis rangų skirtumas = 12,86, p = 0,113) ar baimės atminties grupėje (vidutinis rangų skirtumas = 2,571, p > 0,999) nepasižymėjo ryškesne Fos išraiška nei namų ląstelių grupė (4I pav.).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 （3） = 13,89 ， P = 0,003） 使得 消组 （（Vidutinis rango difffas.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Vidutinis reitingo skirtumas = 12,86, p = 0,113) 或恐惧弞忆组 (Vidutinis reitingo skirtumas) 或恐惧弞忆缌).= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退 (vidutinis reitingo skirtumas = 12,86, p = 0,113)）.Antra, buvo reikšmingų Fos ekspresijos skirtumų pPVT tarp gerų, blogų, baimės prisiminimų ir namų ląstelių grupių (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), todėl gerų suvartojamų grupių grupė (vidutinis rango skirtumas = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), bet ne blogiau išnykimo (vidutinis rango skirtumas = 12,86, p = 0,113) arba baimės prisiminimo grupėje (vidutinis rango skirtumas = 2,571, p > 0,999) nei namų ląstelių grupėje (4I pav.)..Tačiau reikšmingos koreliacijos tarp pPVT Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo (rs = 0,051, p = 0,825) nebuvo (4J pav.).Galiausiai, buvo reikšmingas Fos ekspresijos skirtumas pPVT IL aferentuose tarp grupių, kurių išnykimas geras, blogas išnykimas, baimės prisiminimai, ir namų ląstelėse (X2(3) = 12,34 p = 0,006), todėl gera Fos ekspresija IL- buvo blogiau nei išnykimo grupėse (vidutinis rango skirtumas = 12,54, p = 0,014) ir namų ląstelėje (vidutinis rango skirtumas = 12,89, p = 0,049) (4K pav.) ir reikšmingai koreliavo su IL aferentais pPVT tarp aktyvacijos ir išnykimo atšaukimas, geresnis išnykimo prisiminimas buvo susijęs su didesniu šių IL aferentų aktyvavimu (rs = -0,438, p = 0,047) (4L pav.).
Fos aktyvumas padidėjo žiurkių užpakalinio paraventrikulinio talamo (PVT) IL aferentuose, o tai parodė gerą regresiją.(A) Fos ekspresijoje aPVT reikšmingų skirtumų tarp grupių nebuvo.(B) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo aPVT.(C) Baimės prisiminimo grupė parodė padidėjusią Fos ekspresiją IL aferentuose, palyginti su visomis kitomis grupėmis.(D) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo aPVT.(E) Fos ekspresijoje mPVT reikšmingų tarpgrupinių skirtumų nebuvo.(F) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo atminties mPVT.(G) Fos ekspresija aferentinėse IL ląstelėse mPVT grupėse reikšmingai nesiskyrė.(H) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo mPVT.(I) Gerai išnykusi grupė, bet jokia kita grupė, padidino Fos aktyvumą pPVT, palyginti su namų narvelio grupe.(J) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo pPVT.(K) Geros išnykimo grupė padidino Fos ekspresiją IL aferentinėse ląstelėse, palyginti su silpna išnykimo grupe ir namų ląstelių grupe.(L) Yra reikšminga koreliacija tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo, todėl geras išnykimo prisiminimas yra susijęs su didesne Fos ekspresija IL aferentuose.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Tada visose grupėse buvo analizuojamas pasaulinis ir IL projekcijai būdingas Fos aktyvumas žiurkių aCLA ir mCLA. Buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), todėl baimės prisiminimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas = 14,50, p = 0,049), tačiau nei prastos (vidutinis reitingo skirtumas = 10,21, p = 0,373), nei geros išnykimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = 4,607, p > 0,999) nerodė daugiau Fos išraiškos nei namų narvelio grupė ( 5A pav.). Buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), todėl baimės prisiminimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas = 14,50, p = 0,049), tačiau nei prastos (vidutinis reitingo skirtumas = 10,21, p = 0,373), nei geros išnykimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = 4,607, p > 0,999) nerodė daugiau Fos išraiškos nei namų narvelio grupė ( 5A pav.). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис . 5А). Tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių buvo reikšmingas aCLA Fos raiškos skirtumas (X2(3) = 8,455, p = 0,036), todėl baimės prisiminimo grupė (vidutinis rango skirtumas = 14,50, p = 0,049), tačiau nei prastos (vidutinis rangų skirtumas = 10,21, p = 0,373), nei geros išnykimo grupės (vidutinis rango skirtumas = 4,607, p > 0,999) nepasižymėjo daugiau Fos ekspresijos nei namų ląstelių grupė (.5A pav.) . acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 、 恐惧 回忆 和 和 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组0,049） ， 但 无论是 （（平均 秩差 = 10,21 ， P = 0,373） 还是 良好 灭绝 （平均 秩差 = 4,607 ， P> 0,999） 组 ， 都 显示 出 比 笼组 更 多 的 表达 表达 表达 （（图 5a) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (mean Rangas diff. = 14,50 ， p = p = p = p = p = 14. 0,049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 良好 （（平均 秩差 秩差 秩差 = 4,607 ， p> p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). ACLA Fos išraiškoje buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių (X2(3) = 8,455, p = 0,036), todėl baimės prisiminimo grupė (vidutinis rango skirtumas = 14,50), p = 0,049 ), tačiau grupės, turinčios prastą (vidutinis rangų skirtumas = 10,21, p = 0,373) ir gerą išnykimą (vidutinis rango skirtumas = 4,607, p > 0,999), parodė didesnę Fos ekspresiją nei namų ląstelių grupė (5A pav.). .Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp pasaulinės Fos ekspresijos (rs = 0,036, p = 0,876) (5B pav.) arba Fos ekspresijos IL aCLA aferentinėse ląstelėse (rs = -0,282, p = 0,215) ir išnykimo prisiminimo (5B pav.)..5D), taip pat nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijos aCLA IL aferentuose (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (5C pav.)..). Be to, buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), kad gero išnykimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas . = 12,93, p = 0,038), tačiau nei prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 5,143, p > 0,999), nei baimės prisiminimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = 14,00, p = 0,063) neparodė žymiai daugiau Fos išraiškos mCLA. palyginti su namų narvų grupe (5E pav.). Be to, buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), kad gero išnykimo grupė (vidutinis reitingo skirtumas . = 12,93, p = 0,038), tačiau nei prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 5,143, p > 0,999), nei baimės prisiminimo grupės (vidutinis reitingo skirtumas = 14,00, p = 0,063) neparodė žymiai daugiau Fos išraiškos mCLA. palyginti su namų narvų grupe (5E pav.). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos в mCLA. Tada buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimų ir namų ląstelių grupių mCLA Fos ekspresijoje (X2(3) = 10,12, p = 0,018), todėl gero išnykimo grupė (vidutinis skirtumas yra 12,93, p). = 0,038), tačiau nei prastos išnykimo grupės (vidutinis rango skirtumas = 5,143, p > 0,999), nei baimės prisiminimo grupės (vidutinis rango skirtumas = 14,00, p = 0,063) neparodė reikšmingai didesnės Fos ekspresijos mCLA.palyginti su namų narvų grupe (5E pav.).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， 良好 （（（（（（ ((((Vidutinis reitingo skirtumas).= 12,93, p = 0,038) ， 但 在 在 McLA 中 ， 弱消退 （（平均 = 5,143 ， P> 0,999） 和 恐惧 回忆组 （平均 秩差 = 14,00 ， P = 0,063） 均 未 出 更 更 多 的 的 表达 表达 表达 表达 表达相对于家庭笼组（图5E）. = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 在 McLA 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， P> 0,999） 和 回忆组 （平均 = 14,00 ， P = 0,063） 未 显示 出 更 更 更 多 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 平均 秩差 秩差 = 14,00 ， fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Be to, reikšmingai skyrėsi Fos ekspresija mCLA tarp geros išnykimo grupės, prastos išnykimo grupės, baimės grįžtamojo ryšio grupės ir namų ląstelių grupės (X2(3) = 10,12, p = 0,018), taigi, geros būklės. išnykimas (vidutinis rango skirtumas = 12,93, p = 0,038), tačiau mCLA nei silpnas išnykimas (vidutinis rango skirtumas = 5,143, p > 0,999), nei baimės prisiminimo grupė (vidutinis rango skirtumas = 14,00, p = 0,999) = 0,063 Multi Fos ekspresija, palyginti su namų ląstelių grupe (5E pav.).Tačiau pasaulinė Fos ekspresija mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (5F pav.) arba aferentinės IL mCLA ląstelėse (rs = -0,121, p = 0,602) ir išnykimo atšaukimas (5H pav.), reikšmingo skirtumo tarp grupės, turinčios gerą išnykimą, prastą išnykimą, baimės prisiminimą ir namų ląstelę Fos ekspresijai IL mCLA aferentinėse ląstelėse (X2 (3) = 4,923, p = 0,178) (5G pav.).
Fos aktyvumas buvo padidėjęs žiurkių, turinčių gerą išnykimo atmintį, klausos vidurio viduryje.(A) Baimės prisiminimo grupė, bet ne kitos grupės, parodė didesnį Fos aktyvumą, palyginti su namų ląstelių grupe aCLA.(B) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos aCLA ir išnykimo prisiminimo.(C) Fos ekspresija IL aferentinėse aCLA ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(D) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo aCLA.(E) Gerai išnykusi grupė, bet ne kitos grupės, parodė didesnį Fos aktyvumą mCLA, ​​palyginti su namų ląstelių grupe.(F) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo mCLA.(G) Fos ekspresija IL mCLA aferentinėse ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(H) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo mCLA.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.
Tada visose žiurkių grupėse buvo analizuojamas pasaulinis ir IL projekcijai būdingas Fos aktyvumas mBLA ir pBLA.Fos ekspresijoje mBLA reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių nebuvo (X2(3)=0,944, p=0,815) (6A pav.).Taip pat nebuvo reikšmingo skirtumo tarp grupių, kurių regresija buvo gera, bloga regresija, baimės prisiminimas ir namų ląstelių Fos ekspresija IL mBLA aferentinėse ląstelėse (X2(3)=0,518, p=0,915) (6C pav.).Be to, nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp pasaulinės Fos ekspresijos mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (6B pav.) ir Fos ekspresijos IL mBLA aferentinėse ląstelėse (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).6D paveikslas) ir išnykimo prisiminimas.Taip pat nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės atminties ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijos pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (6E pav.), taip pat nebuvo reikšmingo skirtumo. pBLA Good.išnykimas, prastas išnykimas, baimės prisiminimas ir namų ląstelių grupės Fos ekspresijoje IL aferentinėse ląstelėse (X2 (3) = 1,954, p = 0,582) (6G pav.).Galiausiai, visuotinė Fos ekspresija pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (6F pav.) ir Fos ekspresija pBLA IL aferentinėse ląstelėse (rs = 0,122, p = 0,597) ir išnykimo atšaukimas (6H pav.).
Individualūs išnykimo dauginimosi skirtumai nebuvo susieti su Fos ekspresijos skirtumais bazolaterinėje migdolinėje dalyje.(A) Fos ekspresijos mBLA reikšmingų tarpgrupinių skirtumų nebuvo.(B) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo mBLA.(C) Fos ekspresija IL mBLA aferentinėse ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(D) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentinėse ląstelėse ir išnykimo prisiminimo mBLA.(E) Fos ekspresijoje pBLA reikšmingų tarpgrupinių skirtumų nebuvo.(F) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo pBLA.(G) Fos ekspresija aferentinėse IL pBLA ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(H) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentinėse ląstelėse ir išnykimo prisiminimo pBLA.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį.
Galiausiai, visų žiurkių mvHPC ir pvHPC buvo analizuojamas pasaulinis ir IL projekcijai būdingas Fos aktyvumas. Buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), kad geras išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 13,29) , p = 0,031), tačiau nei prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 6,857, p > 0,999), nei baimės prisiminimas (vidutinis reitingo skirtumas = 8,000, p = 0,864) nepasižymėjo didesne Fos išraiška nei namų narvelio grupė (1 pav.). 7A). Buvo reikšmingas skirtumas tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų narvelio grupių Fos išraiškoje mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), kad geras išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 13,29) , p = 0,031), tačiau nei prastas išnykimas (vidutinis reitingo skirtumas = 6,857, p > 0,999), nei baimės prisiminimas (vidutinis reitingo skirtumas = 8,000, p = 0,864) nepasižymėjo didesne Fos išraiška nei namų narvelio grupė (1 pav.). 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Buvo reikšmingas mvHPC Fos ekspresijos skirtumas tarp grupių, kurių išnykimas geras, išnykimas, baimės prisiminimas ir namų ląstelės (X2(3) = 8,056, p = 0,045), taigi geras išnykimas (vidutinis rango skirtumas = 13,29), p = 0,031), tačiau nei prasto išnykimo grupėje (vidutinis rango skirtumas = 6,857, p > 0,999), nei baimės prisiminimo grupėje (vidutinis rango skirtumas = 8,000, p = 0,864) Fos išraiška nebuvo didesnė nei namų grupėje.ląstelė (7A pav.). MVHPC 中 fos 表达 良好 良好 、 不良 消退 、 、 恐惧 回忆 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 因此 消退 消退 （秩差 秩差 = 13,29） ， ， p = 0,031 A MVHPC 中 FOS 表达 消退 、 不良 消退 恐惧 恐惧 回忆 和 家庭 之间 存在 显着 差异 （（（x2 (3) = 8,056, p = 0,045） ， 良好 （（（平均 秩差 = 13,29） P = 0,031） A ）)）))) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Buvo reikšmingas skirtumas tarp gerų, blogų, baimės prisiminimų ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijai mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045), todėl regresija buvo gera (vidutinis rango skirtumas = 13,29), p = 0,031), tačiau grupės su silpnu išnykimu (vidutinis rangų skirtumas = 6,857, p > 0,999) ir baimės prisiminimų (vidutinis rangų skirtumas = 8,000, p = 0,864) parodė didesnę Fos raišką nei grupėje namuose narve (2 pav.).7A).Tačiau reikšmingo skirtumo nebuvo (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (7C pav.).Be to, nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp pasaulinės Fos ekspresijos mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (7B pav.) ir Fos ekspresijos mvHPC aferentinėse IL ląstelėse (rs = 0,056, p = 0,810) (7D pav.).ir pranešimą apie dingimą.Be to, nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gero išnykimo, prasto išnykimo, baimės prisiminimo ir namų ląstelių grupių Fos ekspresijos pvHPC (X2 (3) = 3,623, p = 0,353) (7E pav.), ir nebuvo jokių reikšmingų skirtumų.geros Fos ekspresijos regresijos skirtumas pvHPC aferentinėse IL ląstelėse, bloga regresija, baimės atmintis ir namų ląstelių grupėse (X2(3)=3,871, p=0,276) (7G pav.).Galiausiai, nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp pvHPC pasaulinės Fos ekspresijos (rs = –0,127, p = 0,584) (7F pav.) ir Fos ekspresijos IL aferentinėse pvHPC ląstelėse (rs = 0,176, p = 0,447) ir išnykimo atkūrimo (7F pav.) ).7H).
Fos ekspresija yra padidėjusi žiurkių ventraliniame hipokampe, o tai rodo gerą atminties išnykimą.(A) Gerai išnykusi grupė, bet ne kitos grupės, padidino Fos ekspresiją mvHPC, palyginti su namų ląstelių grupe.(B) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo mvPHC.(C) Fos ekspresija mvHPC aferentinėse IL ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(D) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo mvHPC.(E) Fos ekspresijoje pvHPC reikšmingų skirtumų tarp grupių nebuvo.(F) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos ir išnykimo prisiminimo pvHPC.(G) Fos ekspresija pVHPC aferentinėse IL ląstelėse grupėse reikšmingai nesiskyrė.(H) Nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp Fos ekspresijos IL aferentuose ir išnykimo prisiminimo pvHPC.Klaidų juostos rodo standartinį vidurkio nuokrypį. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.Mūsų pirminė visų regionų analizė parodė palyginimą trimis lygiais išilgai anteroposteriorinės ašies, nors mes taip pat išanalizavome kiekvieną regioną, kuris žlugo išilgai anteroposteriorinės ašies.Šių analizių rezultatai pateikti 1 lentelėje.
Čia išbandėme, ar individualūs išnykimo prisiminimo skirtumai atsispindėtų skirtinguose aferentinio aktyvumo modeliuose apatinėje limbinėje žievėje.Šiuo tikslu įvertinome Fos aktyvumą IL projekcijose iš paraventrikulinio talamo, klausos, bazolateralinės tonzilės ir ventralinio hipokampo po išnykimo pakartojimo.IL projekcinėse ląstelėse mes nustatėme didesnį aktyvumą užpakalinėje PVT srityje žiurkėms, kurių išnykimas buvo geras, palyginti su žiurkėmis, kurių išnykimas buvo silpnas.Nebuvo jokių skirtumų tarp IL aferentų nuo raktikaulio branduolio, ventralinio hipokampo ar bazolaterinės tonzilės.Be IL projekcinių ląstelių, buvo pastebėtas padidėjęs nervinis aktyvumas pasirinktose žiurkės klausos ir ventralinio hipokampo srityse su gera skiriamąja geba.Mūsų rezultatai rodo, kad sėkmingą išnykimo atmintį organizuoja specifinės PVT projekcijos į IL ir ne į IL nukreiptas ląsteles klausyme ir ventraliniame hipokampe.
Mes nustatėme, kad PVT IL prognozė buvo aktyvi žiurkėms, kurių išnykimas buvo geras, o tai atitinka neseniai atliktą tyrimą, rodantį, kad PVT reikalingas išnykimo atminimui.Šiame tyrime nebuvo naudojamos specifinės subregiono manipuliacijos, tačiau parodė, kad išnykimui atkurti reikėjo tiek PVT projekcijos ant šoninės centrinės amygdalos, tiek IL projekcijos ant PVT.Mūsų rezultatai rodo, kad, be IL-PVT-CeL grandinės, po PVT taip pat gali prireikti patekti į IL, norint atšaukti gesinimą.Taigi paaiškėja, kad išnykimo atkūrime dalyvauja ir eferentiniai, ir aferentiniai IL ryšiai.Kitas svarbus žingsnis yra nustatyti, dėl ko pPVT signalizuoja apie išnykimo reprodukciją neuroninės grandinės lygiu.Be ryšio su IL, ankstesni kanalų sekimo tyrimai 31, 32 parodė, kad pPVT gauna įvestį iš ventralinio periakveduktinio pilkumo (vPAG), kuris yra susijęs su išnykimo mokymusi 33, 34, 35, 36.Nors vPAG vaidmuo išnykimo atšaukime nenustatytas, vPAG prognozuojamas pPVT yra patrauklus kandidatas dėl jų tankio ir abiejų regionų dalyvavimo kuriant ankstesnius baimės išnykimo įrodymus.
Kitas svarbus mūsų PVT rezultatų aspektas yra tai, kad jie specializuojasi išilgai jų priekinės ir užpakalinės ašies.Stebėtina, kad PVT projekcijos neuronų aktyvumas IL koreliuoja su priešinga elgsenos būsena, todėl IL projekcijos aktyvumas prieš PVT yra susijęs su baimės prisiminimu, o pPVT projekcija yra aktyvi po sėkmingo prisiminimo išnykimo (ty baimės).Šis funkcinis PVT heterogeniškumas nestebina, atsižvelgiant į ankstesnį darbą [aptartas 37].Ryškus PVT funkcinio pasiskirstymo pavyzdys neseniai pasirodė tyrime, kuriame buvo apibūdintos specifinių ląstelių tipų savybės PVT.Šis tyrimas rodo, kad DRD2 ekspresuojančios dopamino ląstelės daugiausia ekspresuojamos pPVT, inervuoja priekinių galūnių žievę ir reaguoja į aversinius dirgiklius.Antroji ląstelių populiacija daugiausia ekspresuojama aPVT ir žymi perėjimą į mažo fiziologinio susijaudinimo būseną ir inervuoja apatinių galūnių žievę.Mūsų rezultatai vargu ar tinka šiam modeliui, nes IL projektuojančios aPVT ląstelės yra aktyvios baimės prisiminimo metu, o pPVT projekcijos yra aktyvios, o gyvūnai turi žemą baimės lygį.Yra bent du galimi akivaizdaus neatitikimo paaiškinimai.Pirma, nustatyti ląstelių tipai yra ne tik vienoje priekinėje ir užpakalinėje TVV vietoje.Taigi, aktyvios IL projekcinės pPVT ląstelės žiurkėse, turinčiose gerą išnykimo atmintį, gali priklausyti ląstelių klasei, kurios dažniau aptinkamos aPVT ir signalizuoja apie perėjimą prie mažo susijaudinimo būsenos.Tas pats gali būti pasakytina ir apie IL projektuojančias aPVT ląsteles, aktyvuotas po baimės atminties.Antra, ankstesniuose atsekimo tyrimuose nustatyta, kad yra IL3 projekcinių pPVT, nors kai kurie atrodo, kad jie yra gauti iš DRD2 turinčių ląstelių, kiti ląstelių tipai gali projektuotis į IL ir suaktyvėti sėkmingai atkuriant gesinimą.
Nors šio tyrimo tikslas buvo nustatyti skirtumus tarp žiurkių, turinčių skirtingus išnykimo fenotipus, šie eksperimentai taip pat atskleidė naujų duomenų, susijusių su baimės atminties mechanizmais.Įdomu tai, kad žiurkėms, turinčioms baimės atmintį, priekinėje CLA dalyje nustatėme padidėjusį Fos aktyvumą.
Raktikaulis yra žievės komunikacijos centras ir dalyvauja procesuose, pradedant nuo jutimo integracijos iki dėmesio ir miego40, 41, 42, 43.Yra nedaug įrodymų, kaip klaustrumas yra susijęs su baimės sąlygojimu ar baimės išraiška, tačiau ankstesni tyrimai parodė, kad kontekstinė baimės išraiška yra susijusi su Fos veikla klausumoje.Neseniai buvo pranešta, kad atrezijos projekcijų į entorinalinę žievę slopinimas kontekstinio baimės kondicionavimo metu pablogina ilgalaikės atminties formavimąsi, nors jų baimės išraiškos poreikis nebuvo patikrintas.Tame pačiame tyrime buvo pastebėtas padidėjęs Fos aktyvavimas, kai gyvūnai buvo veikiami naujoje aplinkoje, palyginti su pelėmis, esančiomis pažįstamoje aplinkoje.Turint tai omenyje, CLA aktyvinimas, apie kurį pranešame, gali būti susijęs su naujos kameros ekspozicija bandymo metu, o ne dėl paties atšaukimo baimės.Norint tiksliau apibūdinti spynų funkciją baimėje ir situacijos apdorojime, būsimuose tyrimuose turėtų būti naudojamas tikslinis spynų manipuliavimas.
Nors ankstesnis darbas parodė, kad PVT yra susijęs su baimės atminties išraiška, 45, 46, 47 mes nepastebėjome jokių bendros Fos ekspresijos pokyčių žiurkėms, kai jos prisiminė baimę praėjus 48 valandoms po kondicionavimo.Šį skirtumą galima paaiškinti keliais veiksniais, įskaitant ankstesnio darbo testavimo baimę dėl diskrečių ženklų tame pačiame kontekste, kuriame vyko kondicionavimas, o mūsų eksperimente bandymai buvo atlikti naujame kambaryje.Be to, mes užmigdėme savo gyvūnus praėjus 60 minučių po bandymo, o ankstesniame darbe buvo naudojamas 90 minučių laikas.Galiausiai ankstesniuose tyrimuose bandymas buvo atliktas patalpoje, kurioje gyvūnai galėjo reaguoti su apetitu, o mūsų darbe žiurkės buvo išbandytos be apetito atsako.Nors tai leidžia tam tikro laipsnio sąlyginį slopinimą, yra įrodymų, kad leidžiant gyvūnams slopinti spaudimą gauti maisto ir bandant, ar jie nebijo užuominų, atsiranda motyvacinis konfliktas (ty baimė prieš atlygį), o tai yra pagrindinis stimuliuojantis veiksnys.dalyvavimas PVT48, 49. .
Yra žinoma, kad bazolaterinis migdolinis kūnas yra susijęs su baimės išnykimu50, 51 ir yra įrodymų, kad BLA projekcijos į IL taip pat dalyvauja šiame procese23.Tačiau neaišku, ar BLA ir jos ryšiai yra susiję su išnykimo grįžimu.Vaizdo tyrimai23,28 parodė padidėjusį BLA aktyvumą gyvūnams, primenantiems išblukusias prisiminimus.Nors mūsų ankstesnis darbas neparodė skirtumo tarp geros ir blogos išnykimo žiurkių BLA aktyvacijos, mūsų rezultatai rodo, kad išnykimo atšaukimas paprastai neturi įtakos BLA ar aktyvacijai prognozuojant BLA IL.Remiantis mūsų išvadomis, nors grandinės manipuliavimo tyrimai rodo, kad IL įvestis į BLA yra svarbi mokymuisi išnykti, jie nėra būtini išnykimo prisiminimui.Tačiau negalima visiškai ignoruoti BLA vaidmens, nes naujausi įrodymai rodo, kad tam tikri BLA ląstelių tipai reikalingi išnykimui atkurti.
Pažymėtina, kad baimės prisiminimas nesukėlė Fos aktyvacijos BLA, nes ankstesni pažeidimo, vaistų ir vaizdavimo tyrimai šią sritį įtraukė į baimės išraišką ir (arba) baimės konsolidaciją po paieškos54, 55, 56, 57.Čia pateikti duomenys sujungia bazinį ir šoninį migdolinio kūno subbrandulį, o ankstesni duomenys rodo, kad baimės išraiška skatina Fos aktyvumą šoninio branduolio nugarinėje pusėje.Atskirai išanalizavome pagrindinius ir šoninius duomenis, tačiau nė vienu atveju nebuvo skirtumo (duomenys nerodomi) ir abi sritys žlugo čia pateiktuose duomenyse.Mes neanalizavome šoninės amygdalos subregionų, todėl specifiniai šios srities pokyčiai gali būti užmaskuoti.Kita galimybė nepakeisti Fos aktyvumo BLA yra dėl baimės prisiminimų laiko, palyginti su kondicionavimu.Kai kurie ankstesni darbai parodė, kad BLA indėlis į baimės išraišką mažėja laikui bėgant po kondicionavimo, todėl išraiška priklauso nuo BLA praėjus 24 valandoms po kondicionavimo, bet nepriklausoma po 7 dienų (žr. 45, bet žr. 58).įvyko praėjus 48 valandoms po treniruotės, todėl Fos aktyvumo pokyčių nebuvimas šiuo metu greičiausiai atspindi nuo laiko priklausomus BLA dalyvavimo baimės išraiškoje pokyčius.
Galiausiai randame įrodymų, kad sėkminga išnykimo atmintis yra susijusi su ventraliniu hipokampu.Tai būdinga „tarpiniams“ vHPC, nes užpakalinėje srityje to paties modelio nebuvo.Remiantis ankstesniu darbu, mes neradome jokių Fos aktyvinimo pokyčių aferentiniuose vHPC IL.Yra rimtų įrodymų, kad vHPC28,60,61 reikalingas baimės aktualizavimui, kai CS atsiranda už konteksto, kuriame įvyksta blukimas, ribų, ir kad tai bent iš dalies priklauso nuo vHPC patekimo į IL13.Remiantis šiais ankstesniais rezultatais, tikėtume, kad prastas išblukimas bus susijęs su padidėjusiu numatomu vHPC IL aktyvumu.Tačiau taip nebuvo, nes Fos aktyvumas nesiskyrė IL suplanuotuose retrogradiškai pažymėtuose vHPC arba nepažymėtose vHPC ląstelėse.Tai rodo, kad nesugebėjimas prisiminti išblukimo blukimo kontekste gali sukelti kitokį mechanizmą nei atsinaujinimo baimė.
Svarbu atkreipti dėmesį į kai kuriuos būdingus projektavimo ir analizės apribojimus ir kaip jie veikia mūsų išvadas.Pirmiausia gyvūnus suskirstėme į viršutinį ir apatinį trečdalį, o peles į „gerus“ ir „blogus“, remdamiesi išnykimo prisiminimo balais.Tai daroma siekiant išvengti grupinių schemų, pagal kurias gyvūnai skirstomi į atskiras grupes nuo pasiskirstymo vidurio, arba grupinių schemų, pagal kurias gyvūnai neįtraukiami į pasiskirstymo vidurį, pvz., atskyrimas pagal medianą arba viršutinio ir apatinio žiurkių trečdalių palyginimas. .norime išvengti šios situacijos, nes mediana neatspindi žmogaus atsako į traumą kintamumo, kurį bandome modeliuoti.Be to, nors lyginant viršutinį ir apatinį žiurkių trečdalius, galime palyginti panašaus dydžio grupes, šis metodas nepaiso pasiskirstymo centre esančių gyvūnų ir tiksliai neatspindi reakcijų į sužalojimą kintamumo.Nors mūsų metodas gali turėti problemų dėl nevienalytės dispersijos ir lyginant grupes su nevienodo dydžio imties dydžiais, jis užfiksuoja tai, ką bandome imituoti geriau nei alternatyvūs metodai.
Čia pateikti rezultatai padeda mums geriau suprasti, kaip individualūs išnykimo prisiminimo skirtumai atsispindi nervų grandinės veiklos skirtumai.Mūsų išvados gali būti susijusios su potrauminio streso sutrikimu, kuris, kaip žinoma, yra susijęs su pernelyg didele baime ir nesugebėjimu pašalinti baimės reakcijų.Mes parodome, kad išnykimo prisiminimo skirtumai yra susiję su vidinės ir išorinės nervinės veiklos skirtumais, projektuojamais į IL.Šie skirtumai buvo paskirstyti skirtinguose regionuose išilgai anteroposteriorinės ašies, dar labiau pabrėžiant smegenų funkcijos įvertinimo subregioniniu lygiu svarbą.Dabartinio metodo trūkumai yra tyrimo aktualumas ir dėmesys graužikų patinams.Būsimi tyrimai turėtų nustatyti neurobiologinius mechanizmus, kuriais grindžiamas graužikų moterų išnykimo mokymasis, ir naudoti metodus priežastinėms išvadoms daryti.
Šiame tyrime naudotus ir (arba) analizuotus duomenų rinkinius pagrįstu prašymu gali gauti atitinkami autoriai.
Pavlov IP kondicionavimas: smegenų žievės fiziologinio aktyvumo tyrimas.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO ir Davis, M. Mokymosi principų taikymas potrauminių reakcijų gydymui. Rothbaum, BO ir Davis, M. Mokymosi principų taikymas potrauminių reakcijų gydymui.Rotbaum BO ir Davis M. Mokymosi principų taikymas potrauminių reakcijų gydymui.Rotbaum BO ir Davis M. Mokymosi principų taikymas gydant potraumines reakcijas.diegti.Niujorko koledžas.Mokslas.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozicijos terapijos apžvalga: auksinis PTSD gydymo standartas. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozicijos terapijos apžvalga: auksinis PTSD gydymo standartas.Rauch SA, Eftekhari A. ir Ruzek DI Ekspozicijos terapijos apžvalga: auksinis standartas potrauminio streso sutrikimo gydymas. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozicijos terapijos apžvalga: auksinis PTSD gydymo standartas.Rauch, SA, Eftekhari, A. ir Ruzek, DI Ekspozicijos terapijos apžvalga: auksinis standartinis potrauminio streso sutrikimo gydymas.J. Reabilitacija.rezervuaro plėtra 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Ilgo poveikio terapija: praeitis, dabartis ir ateitis.Nerimo slopinimas 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
P. Millard ir kt.Egzistencinės ir įgytos atminties praradimo priežastys potrauminio streso sutrikimo atveju: dvynių tyrimo išvados.J. Psichiatras.saugojimo bakas.42(7), 515-520 (2008).
P. Millard ir kt.Neurobiologinis nesugebėjimo prisiminti blėstančių prisiminimų potrauminio streso sutrikimo pagrindas.biologija.Psichologija.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualūs baimės skirtumai: baimės reaktyvumo ir baimės atsigavimo fenotipų išskyrimas. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualūs baimės skirtumai: baimės reaktyvumo ir baimės atsigavimo fenotipų išskyrimas.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ir LeDoux, JE Individualūs baimės skirtumai: baimės reaktyvumo ir baimės atkūrimo fenotipų išskyrimas. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualūs baimės skirtumai: baimės atsako ir baimės atkūrimo lentelė.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ir LeDoux, JE Individualūs baimės skirtumai: baimės atsako izoliacija ir baimės atsigavimo fenotipas.J. Trauma.spaudimas 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Akustinis žiurkių išgąsčio atsakas numato skirtingus baimės išnykimo pokyčius. Russo, AS & Parsons, RG Akustinis žiurkių išgąsčio atsakas numato skirtingus baimės išnykimo pokyčius.Russo, AS ir Parsons, RG Akustinis išgąsčio atsakas žiurkėms numato individualius baimės išnykimo skirtumus. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异. Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS ir Parsons, RG Akustinis išgąsčio atsakas žiurkėms numato individualius baimės išnykimo skirtumus.Neurobiologija.studijuoti.Atmintis.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualus baimės išnykimo atšaukimo kintamumas yra susijęs su mitogeno aktyvuotos proteinkinazės fosforilinimu infralimbinėje žievėje. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualus baimės išnykimo atšaukimo kintamumas yra susijęs su mitogeno aktyvuotos proteinkinazės fosforilinimu infralimbinėje žievėje.Russo, AS, Lee, J. ir Parsons, RG Individualus baimės prisiminimo išnykimo kintamumas yra susijęs su mitogeno aktyvuota baltymų kinazės fosforilinimu infralimbinėje žievėje. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂原活化蛋白激鴻化蛋白激 Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Baimės išblėsimo prisiminimas yra susijęs su individualiais periferinio 美裯中丝裂原活化筒能激酶的fosforifikavimo skirtumais.Russo, AS, Lee, J. ir Parsons, RG Individualūs baimės išnykimo skirtumai prisiminimo metu yra susiję su mitogeno aktyvuotų baltymų kinazių fosforilinimu apatinių galūnių žievėje.Psychopharmacology 236(7), 2039–2048 (2019).